第十題,實驗設計題。請同學們一篇材料。
核酸限制性內切酶是重組DNA技術中最重要的工具酶之一,它是一類能識別雙鏈DNA中特定堿基序列,內切方式水解DNA鏈的核酸水解酶。最適合基因工程操作的限制內切酶為第二類內切酶,這類酶的一個重要特點是切割的斷裂點都在反轉重復序列上,亦稱回文式序列,如:
EcoRI
5’-G↓AATTC-3’
3’-CTTAA↑G-5’
BamHI
……
請設計一個質粒DNA的限制性內切酶酶解鑒定實驗。
‘還好我做過核酸的其他實驗,這個核酸限制性內切酶的實驗設計,編吧!’
蘭杰并沒有親手做過限制性內切酶的實驗,他也很想做啊,然而限制內切酶是昂貴的生化試劑,教練不給他做。
這個時候,蘭杰只能依靠類似實驗的操作經歷及豐富的理論知識儲備,進行合理的編排。
第一步,酶切反應。
第二步,電泳凝膠板的制備。
第三步,電泳加樣。
第四步,電泳與鑒定。
蘭杰首先設計出四個主要的實驗步驟。
需要的實驗材料包括:質粒DNA、反應緩沖液、BSA、限制性內切酶……
需要的實驗器材包括:電泳槽與電泳儀、紫外檢測儀、電熱恒溫水浴箱……
然后就是細化每一個步驟,寫出具體的實驗操作細節。
‘設計完了,理論上應該是可行的。’
蘭杰從頭到尾檢查一遍試卷,剛檢查完,鈴聲響起,交卷。
明天將進行實驗考試,雷天剛對他的隊員們說:“理論考試自我感覺良好的同學,可以和我們教練團隊溝通一下理論考試的情況。自我感覺一般的同學,你們回宿舍好好休息,調整狀態,積極備戰明天的實驗考試。”
雷天剛說罷,有一半的隊員回去休息了,剩下的一半隊員跟教練們對答案。
“對對對!我是這么寫的!”
“哈哈!我又做對一題!”
“啊?錯了?”
“又錯了?”
“第六題之后,我全錯?”
“我特么心態崩了啊!”
……